Seurat は、単一細胞解析用の重量級の R パッケージです。使用したことがある人なら誰でも、その便利さを知っています。 Seurat 分析プロセスは、基本的に、フィルタリング、tSNE、UMAP 次元削減、描画など、単一細胞分析における一般的な分析方法をすべてカバーします。もう一つの重要な機能は、異なる実験間のバッチ効果を修正することです。しかし、Seurat 2 と Seurat 3 の補正方法はまったく異なり、得られる結果に一貫性がありません。 Seurat 2 は CCA (正準相関) に基づいており、腫瘍、末梢血、隣接する癌組織間の実験によって生じるバッチ効果を補正できます。また、異なる単一細胞実験プラットフォームを使用した実験によって生じるバッチ効果も補正できます。速度は遅いですが、効果は良好です。 Seurat 3 は、サンプル間で類似した発現プロファイルを持つ細胞集団に基づいて補正を行います。同じ性質の実験の場合、Seurat 3 は、異なる単一細胞技術によって引き起こされる実験バッチ効果を適切に補正できます。公式サイトに掲載されているパンサーズ補正結果から、その補正能力がいかに強力であるかが分かります。しかし、このような強力な補正能力により、腫瘍と末梢血サンプルの補正が過剰になり、グループ化されるべきでない細胞が類似した遺伝子発現プロファイルを持つ結果となりました。私もいくつかのプロジェクトに取り組んできましたが、そのすべてでこの問題が見つかったため、Seurat 3 の修正方法を断念し、Seurat 2 を使い続けました。ただし、Seurat 3 の findmarker 関数は、一度に 100,000 個を超えるセルをエラーなしでカウントできますが、Seurat 2 ではできません。妥協案としては、Seurat 2 と Seurat 3 のパッケージを同時にインストールし、ローカルに書き込んでからアップグレードのために Seurat 3 で読み取るのではなく、メモリ内のデータを切り替えることです。 特に数万個のセルの場合、データをローカルに保存するのに少なくとも 30 分、それを読み取るのに 30 分かかります。 ここで、ローカルで読み書きせずに、Seurat 2 と Seurat 3 を完全に切り替える方法を説明します。 実際、方法は非常に簡単です。Seurat 2 と Seurat 3 を別のライブラリにインストールするだけです。 私はそれをインストールしました、私のフリースイッチングを例として挙げます: > Rバージョン _ プラットフォーム x86_64-conda_cos6-linux-gnu アーチx86_64 OS Linux-GNU システム x86_64、linux-gnu 状態 メジャー3 マイナー 6.1 2019年 月 07 5日目 SVN リビジョン 76782 言語 R version.string R バージョン 3.6.1 (2019-07-05) ニックネーム つま先の動作 私は最新の R バージョン 3.6.1 を使用していますが、非常にうまく動作します。 デフォルトのライブラリはcondaに付属しているものです > .libPaths() [1] 「/data/home/heshuai/anaconda3/lib/R/library」 デフォルトのSeuratはSeurat 3の最新バージョンです > 図書館(スーラ) 登録された S3 メソッドが 'R.oo' によって上書きされました: 方法から throw.default R.methodsS3 > packageVersion("Seurat") [1] '3.0.2' Seurat 2を別のライブラリにインストールしました /data/home/heshuai/R/x86_64-conda_cos6-linux-gnu-ライブラリ 2つを自由に切り替える 1. まずSeurat 2が配置されているライブラリをロードします > .libPaths("/data/home/heshuai/R/x86_64-conda_cos6-linux-gnu-library") > .libPaths() [1] 「/data/home/heshuai/R/x86_64-conda_cos6-linux-gnu-library」 「/data/home/heshuai/anaconda3/lib/R/library」 > 2. Seurat 3 をデタッチしてから、Seurat 2 をロードします。Seurat 2 が配置されているライブラリはすでに Seurat 3 より前にあるため、デフォルトではシステムは最初に Seurat 2 をロードします。 > デタッチ("パッケージ:Seurat", アンロード = T) > 図書館(スーラ) 必要なパッケージを読み込んでいます: ggplot2 RStudio コミュニティは、サポートを受けるのに最適な場所です: https://community.rstudio.com/c/tidyverse。 必要なパッケージを読み込んでいます: cowplot ******************************************************** 注: バージョン1.0.0では、cowplotは デフォルトのggplot2テーマはもう使用できません。以前の 動作、実行: theme_set(theme_cowplot()) ******************************************************** 必要なパッケージを読み込んでいます: Matrix > packageVersion("Seurat") [1] '2.3.4' > これで、Seurat 3 は Seurat 2 に正常に切り替えられました。Seurat 3 をロードする場合は、デフォルトのライブラリを Seurat 2 の前に変更するだけです。 とても簡単じゃないですか? 要約する 上記は、Linux で同じバージョンの R を使用して Seurat2 と Seurat3 を同時にインストールするためのチュートリアルです。皆様のお役に立てれば幸いです。ご質問がある場合は、メッセージを残してください。すぐに返信いたします。 以下もご興味があるかもしれません:
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